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蛋白純化通用問題(二)

日期:2022-09-16 05:01
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摘要:蛋白純化通用問題(二)
那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡單介紹一下蛋白純化通用問題(二)。


7、填料如何儲存?
答:請參考說明書。大部分填料可以在 4-40℃ 儲存,不可以冷凍,注意北方的冬天有時候室溫低于零度,運輸和儲存應避免凍住。儲存過程中,注意避免填料干掉,或低溫產生氣泡。
儲存液 :對于耐堿的層析介質,可以使用 0.01M NaOH 作為儲存液 ;對于不耐堿比如親和介質,一般是用 20% 的乙醇或 2% 苯甲醇作為儲存試劑。


8、樣品與緩沖液怎么脫氣和過濾?
答:溶液和樣品必須過濾(0.2um或者0.45um的濾膜過濾)和脫氣,可以使用負壓抽濾瓶過濾,并且在負壓條件下保持10min脫氣。脫氣的方法還包括:超聲15min以上或者使用注射用水配制緩沖液。對于小體積樣品的過濾,可以使用高速離心的方式,吸取上清。


9、AKTA系統的清洗和保存?
答:按時清洗系統或遇到問題時清洗系統。用1M NaOH ,小流速清洗系統30min,之后立即用0.5M NaCl和去離子水將NaOH沖洗干凈并且系統pH保持在中性。系統長時間不使用,需保存在20%乙醇中。


10、如何進行柱前壓校準?
答:取決于柱位閥,斷開所有流路,在system control-system-calibration-歸零。


11、AKTA pure與prime plus的*大耐受壓力?
答:pure 25是20Mpa,pure 150是5Mpa;prime plus 是1Mpa;紫外電導2MPa,PH電極耐壓0.5MPa。


12、如何設置報警壓力?
答:
系統配有多柱位閥:
可以檢測柱子的柱前Pre C壓力,柱后Post C壓力,并且計算出Delta C壓力。
分別設置Pre Column Pressure和Delta Column Pressure的壓力報警保護柱子。

系統無多柱位閥:
先用管道代替柱子連接設備,在工作流速下測定系統本身的壓力,此為空載壓力。
Pre Column Pressure為Max Pre-Column Pressure和Max Delta Column Pressure+空載壓力中較低值。


13、在正確設置了報警壓后,層析柱接入AKTA,總是超壓報警?
答:首先判斷AKTA系統是否本身壓力過高,在線濾膜或者反壓閥堵塞,正常情況下反壓閥空跑系統壓力為0.2左右。如果系統沒有問題,接入柱子出現超壓,可能是柱子堵塞或者連接柱子的管線折彎造成超壓,調整連接管線或者按說明書方式清洗層析柱。

以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結關于蛋白純化通用問題(二)。
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