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淺談層析實驗中的氣泡問題(一)

日期:2022-09-16 12:42
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摘要:淺談層析實驗中的氣泡問題(一)
那么下面上海嘉鵬科技有限公司為大家簡單介紹一下淺談層析實驗中的氣泡問題(一):
       說到氣泡,你可能會聯想到酣暢淋漓的可樂,通透上頭的啤酒,亦或是流光飛舞的浪漫,生活中的氣泡,似乎還帶有那么一絲美好,然而對于實驗來說,尤其是在大多不會配置在線脫氣單元的FPLC系統上做的層析實驗,氣泡就如煩人的蒼蠅,鞋里的石子,令人如鯁在喉不吐不快,如若是重要樣品、昂貴填料,氣泡帶來的實驗失敗那簡直是小型災難現場。那么氣泡是源自何來,而又去之何處,怎么能讓它們從我們的系統里消失,以下此篇,做一個小小探討,拋磚引玉,共謀對策而滅之。


關于氣泡來源,正如病從口入,無非就是進入系統的開口處:流動相,或者流路中相對負壓處的漏點;如果流動相脫氣不理想或儀器本身連接管路、組件存在問題,流路中將形成肆意妄為的氣泡,引發一系列問題: 

      1. 組分峰面積變化,峰形變化;
      2. 形成尖峰或鋸齒狀噪聲;
      3. 出現鬼峰 ,基線漂移波動增大;
      4. 泵動作失常,壓力波動,檢測基線全抖;
      5. 填料走空,干柱;
      6. 溶解氧可能氧化樣品組分和(或)流動相及固定相組分,使檢測失真。
實際案例



Fig.1 氣泡造成的UV雜峰

Fig.2 氣泡造成的系統壓力波動


      這些癥狀基本能覆蓋大部分的層析實驗問題,可見氣泡的破壞力和惱人程度,知己知彼方才能有的放矢,那么氣泡是如何形成的呢?流動相中氣體形成的原因有多種,*根本的還是由于氣體在液體中達到過飽和狀態;平衡狀態時溶解空氣的量與溶液的性質、氣體的種類有關,也與外界條件有關, 主要的外界條件有以下 3 種。


一般來說,溶劑中能溶解氣體的量隨溫度的升高而降低,而當溶劑從低溫狀態下移至高溫時,過量溶解的氣體以氣泡形式逸出。因此,緩沖液溫度的變化,較易引起氣泡的形成。

● 正如我們配置的緩沖液很多時候會保存于層析柜的低溫環境,當實驗需要使用時從層析柜中取出,在室溫環境下會帶來溫度的劇烈變化,改變氣體溶解性,進而產生氣泡,影響實驗,因此緩沖液的使用如果有溫度的變化需要在實驗溫度下擺放一段時間,釋放氣泡后再使用
● 如果層析儀器是在非恒溫實驗室,晝夜會有溫差,白天做完實驗系統保存,經歷夜晚的溫度變化,第*二天系統里很可能會出現氣泡,此時實驗之前充分System wash就非常重要,需要使用高流速將系統內的氣泡吹掃出來,避免影響實驗。

● 當檢測器池處于較高溫度時,池中易產生氣泡,因為液流通過檢測器時,溫度升高而此處的壓力反而減小。如果氣泡形成于檢測器池中,則將出現尖峰狀或鋸齒狀的基線噪聲,甚至于完全無法測定,因此在系統流路中,升溫組件與流路保持相應的溫度隔斷,系統流路溫度的均一性,也非常重要。


以上就是上海嘉鵬科技有限公司為大家整理總結關于淺談層析實驗中的氣泡問題(一)。

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